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TMPRSS2,SARS-CoV-2入侵激活因子

日期:2023-12-12 16:09:20

隨著COVID-19在全球范圍內傳播,科學家們努力探索SARS-CoV-2侵入機制。已經報道了許多SARS-CoV-2與宿主相互作用的靶點,例如ACE2TMPRSS2CD147。SARS-CoV-2與TMPRSS2之間的關系首次在題為“新型冠狀病毒2019(2019-nCoV)使用SARS冠狀病毒受體1 ACE2和細胞蛋白酶TMPRSS2進入目標細胞”的研究中得到了報道[1]。此后,關于TMPRSS2的研究越來越多地被發表。那么,TMPRSS2是什么?SARS-CoV-2如何通過TMPRSS2侵入人體?


1. TMPRSS2的定義

跨膜蛋白酶絲氨酸酶2,也稱為TMPRSS2,是跨膜蛋白酶絲氨酸酶(TMPRSSs)家族的成員,這是一類在細胞膜上具有保守的絲氨酸蛋白酶結構域的蛋白質。TMPRSSs的基本結構相似。C末端的蛋白酶結構域位于細胞外,N末端位于細胞內,并且還具有單一的跨膜結構域。區別在于骨架區域。

正如圖1所示,TMPRSS2基因位于人類染色體21:41, 464, 551-41, 531, 116。TMPRSS2基因的一個顯著特征是多個雄激素受體元件(AREs)位于轉錄起始位點和第一個內含子的上游[2] [3]

TMPRSS2基因組定位示意圖

圖1. TMPRSS2基因組定位示意圖

*圖片來源于Biochimie發表的一篇文章 [2]

由TMPRSS2基因編碼的TMPRSS2蛋白質由492個氨基酸組成,可錨定到細胞質膜。正如圖2所示,它通過Arg255和Ile256之間的自體催化剪切轉化為其形式。剪切后,成熟的蛋白酶大多數都與膜結合,但其中有相當一部分可以釋放到細胞外環境中。蛋白酶催化域含有一個催化三聯體,由氨基酸殘基His296,Asp345和Ser441組成,相應于胰蛋白酶原的His57,Asp102和Ser195 [4]

TMPRSS2蛋白的定位和結構

圖2. TMPRSS2蛋白的定位和結構

*圖片來源于Biochimie發表的一篇文章 [2]


2. TMPRSS2的分布情況

TMPRSS2的表達具有明顯的組織特異性。人類TMPRSS2是一個雄激素調控的、II型跨膜絲氨酸蛋白酶,在前列腺中表達最為豐富,而在肺部、結腸、肝臟、腎臟和胰腺中表達較低水平。根據對小鼠胚胎和成體組織的原位雜交分析,小鼠TMPRSS2也在胃腸道、泌尿生殖道和呼吸道上皮細胞中表達,這表明TMPRSS2在小鼠和人類中的表達分布非常相似。這種組織特異性的表達也暗示,由異常TMPRSS2引起的疾病可能更偏向于男性而不是女性。


3. TMPRSS2的功能

TMPRSS2與前列腺癌密切相關。在2005年,大多數前列腺癌(高達70%)被發現具有TMPRSS2和雌激素調控基因(ERG)的融合,它們都位于染色體21上。此后不久,還發現了其他紅細胞生成特異性(ETS)變異基因(ETV)家族的成員具有基因融合,盡管頻率要低得多,包括ETV1(染色體7)、ETV4(染色體17)、ETV5(染色體3)和ETS結構域含蛋白基因(ELK4,染色體1)。

以TMPRSS2和ERG融合為例,基因融合,也稱為基因重排,常常導致某些基因的異常激活。如圖3所示,基因重排包括在同一染色體上兩個基因之間實際的基因物質喪失;請注意在染色體21上TMPRSS2和ERG之間中間基因的缺失。融合的第二種形式是由于易位,即一個基因移動到同一染色體或不同染色體上的另一個位置。這兩種機制都適用于前列腺癌中的基因重排。鑒于前列腺癌的高發病率,這種融合基因可能是人類癌癥中最常見的融合基因。此外,TMPRSS2-ERG可以作為前列腺癌的診斷標志物。

TMPRESS2-ERG融合機制(21號染色體)

圖3. TMPRESS2-ERG融合機制(21號染色體)

*圖片來源于BJU Int上發表的文章 [5]

另外,除了在前列腺癌中的作用,TMPRSS2還與病毒有關。我們將在下一節中闡述這一功能。


4. TMPRSS2與病毒的聯系

2019年,巖田佳奈子(Naoko Iwata-Yoshikawa)等人的研究顯示,TMPRSS2激活高致病性人類冠狀病毒的刺突蛋白,如嚴重急性呼吸綜合癥相關冠狀病毒(SARS-CoV)和中東呼吸綜合癥相關冠狀病毒(MERS-CoV)。體外實驗中,TMPRSS2的激活誘導病毒與細胞膜在細胞表面融合。在這項研究中,他們使用SARS-CoV和MERS-CoV感染的動物模型研究了TMPRSS2的作用。結果顯示,在呼吸道缺乏TMPRSS2可以減輕SARS-CoV和MERS-CoV感染后肺部病理的嚴重程度 [6]

實際上,早在2011年,Ilona Glowacka和其他來自德國漢諾威醫學院的研究人員就評估了TMPRSS2是否通過其進行SARS-CoV的S蛋白質的蛋白水解。在這項研究中,Western blot分析的結果顯示,TMPRSS2的共表達(順式裂解)和SARS S表達細胞與TMPRSS2陽性細胞接觸(反式裂解)時,SARS S被裂解成幾個片段。順式裂解導致SARS S片段釋放到細胞上清液中,并抑制抗體介導的中和作用。反式裂解激活了效應細胞上的SARS S與靶細胞融合。這表明TMPRSS2可能通過減少病毒被中和抗體識別以及激活SARS S進行細胞間和病毒細胞融合來促進病毒傳播和病理進程 [7]


5. SARS-CoV-2通過TMPRSS2侵入人體的途徑

SARS-CoV-2,一種冠狀病毒,與SARS-CoV具有相似的中心生物特性和類似的結構。關于冠狀病毒通過涉及TMPRSS2進入細胞的方式,早在2013年就有兩項研究報告。其中一種方式是細胞表面通過TMPRSS2介導,另一種方式是通過細胞核中的蛋白酶L介導。Stefanie Gierer等人發現TMPRSS2和半胱氨酸蛋白酶B和L可以激活新型人冠狀病毒EMC(hCoV-EMC)并與靶細胞融合。因此,TMPRSS2和半胱氨酸蛋白酶已成為控制hCoV-EMC的潛在靶點 [8] [9]。2014年,Adeline Heurich和其他人再次證明了TMPRSS2和HAT在冠狀病毒中的作用。他們發現這兩種酶可以裂解并激活SARS-CoV的刺突蛋白以進行膜融合。此外,這些酶還可以裂解SARS-CoV受體ACE2 [10]

在2020年,隨著COVID-19在全球爆發,Markus Hoffmann等人進一步證明了冠狀病毒使用其刺突蛋白來選擇和進入靶細胞,并且SARS-CoV-2刺突(S)驅動的入侵機制可能有助于評估大流行潛力并揭示治療靶點。在他們的研究中,他們證明SARS-CoV-2-S使用SARS-CoV受體ACE2進入,而使用細胞蛋白酶TMPRSS2進行SARS-CoV-2-S的初級加工。TMPRSS2抑制劑可以阻止入侵,可能成為一種治療選擇。這些結果揭示了SARS-CoV-2和SARS-CoV感染之間的重要共同點,可能轉化為類似的傳播能力和疾病發病機制 [1] [11]


6. TMPRSS2研究的最新進展

在本節中,我們列出了TMPRSS2和SARS-CoV-2研究的一些最新進展,如下所示:

? 2021年4月12日,斯坦福大學和愛荷華大學團隊創建了一種名為3DPhyloFold的基于結構的系統演化計算工具,以系統地識別具有已知治療性抑制劑的結構相似的絲氨酸蛋白酶(TMPRSS2),并在體外和體內展示了對SARS-CoV-2感染的有效抑制作用 [12]

? 2021年3月19日,烏爾姆大學醫學中心團隊報告稱,急性相蛋白α1AT是TMPRSS2和SARS-CoV-2入侵的抑制劑,可能在對抗新型冠狀病毒的先天免疫防御中發揮重要作用 [13]

? 2021年3月11日,長庚大學團隊揭示,暴露于空氣污染和潛在的IPF(特發性肺纖維化)增加了SARS-CoV-2感染和COVID-19疾病嚴重程度的風險。這可能通過在肺纖維母細胞中上調ACE2和TMPRSS2并通過阻斷IL-8/CXCR1/2途徑來實現 [14]

? 2021年1月26日,意大利圣馬泰奧大學醫學中心團隊證明,來自不同人體組織的間充質干細胞(MSCs)不會對SARS-CoV-2感染具有感受性,這支持MSCs作為COVID-19潛在治療方法的安全性 [15]

? 2021年1月,北海道大學的研究團隊的研究數據表明,它們無法利用與宿主II型跨膜絲氨酸蛋白酶TMPRSS2介導的直接融合入侵途徑。這項研究證明S蛋白多堿性裂解基序是決定SARS-CoV-2入侵和細胞病毒組織特異性的關鍵因素 [16]


7. 面向SARS-CoV-2治療的靶向TMPRSS2的藥物

越來越多的證據表明,TMPRSS2是SARS-CoV-2(COVID-19)治療中的一個重要靶點。我們將以下列方式搜集了針對SARS-CoV-2治療的靶向TMPRSS2的藥物的最新臨床數據:

標題 藥物類型 適應癥 階段 單位名稱 最后更新日期
Low-dose Hydroxychloroquine and Bromhexine: a Novel Regimen for COVID-19 Prophylaxis in Healthcare Professionals (ELEVATE Trial) 有機雜環類藥物 羥氯喹;抗瘧藥; 酶抑制劑; Antirheumatic Agents 1期早期
 
國家康復研究所 2021年4月5日
Randomized Trial of Bicalutamide to Block TMPRSS2 in Males With COVID-19 Infection 有機雜環類藥物 2019冠狀病毒病 3期 佛羅里達大學 2021年1月27日
RECOVER: Phase 2 Randomized, Double-Blind Trial TREating Hospitalized Patients With COVID-19 With Camostat MesilatE, a TMPRSS2 Inhibitor 有機雜環類藥物 嚴重急性呼吸系統綜合癥 2期 艾倫?布萊斯 2021年1月11日
An Exploratory Analysis of the Expression of Receptors and Activating Proteases Mediating SARS-CoV-2 Entry and the Association Between HSD3B1 Gene Polymorphisms With Outcomes in SARS-CoV-2 Infected Patients / Covid19 N/A 艾倫?布萊斯 2020年8月18日
RAndomized Clinical Trial in COvid19 Patients to Assess the Efficacy of the Transmembrane Protease Serine 2 (TMPRSS2) Inhibitor NAfamostat (RACONA Study) 有機雜環類藥物 COVID19 2期/3期 帕多瓦大學醫院 2020年4月20日
Efficacy of Aerosol Combination Therapy of 13 Cis Retinoic Acid and Captopril for Treating Covid-19 Patients Via Indirect Inhibition of Transmembrane Protease, Serine 2 (TMPRSS2) 有機雜環類藥物 Covid19 2期 Kafrelsheikh 大學 2020年10月26日

參考文獻:

[1] Markus Hoffmann, Hannah Kleine-Weber, et al. The novel coronavirus 2019 (2019-nCoV) uses the SARS-coronavirus receptor ACE2 and the cellular protease TMPRSS2 for entry into target cells [J]. bioRxiv. 2020.

[2] Li Wen Shen, Hui Juan Mao, et al. TMPRSS2: A potential target for treatment of influenza virus and coronavirus infections [J]. Biochimie. 2017.

[3] Y. Park. TMPRSS2 (transmembrane protease, serine 2) [J]. Atlas. Genet. Cytogenet. Oncol. Haematol. 2010, 14: 1163?1165.

[4] B. Lin, C. Ferguson, et al. Prostate-localized and androgen-regulated expression of the membrane-bound serine protease TMPRSS2 [J]. Cancer Res. 1999, 59:4180?4184.

[5] Deloar Hossain and David G. Bostwick. Significance of the TMPRSS2: ERG gene fusion in prostate cancer [J]. BJU Int. 2013.

[6] Naoko Iwata-Yoshikawa, Tadashi Okamura, et al. TMPRSS2 Contributes to Virus Spread and Immunopathology in the Airways of Murine Models After Coronavirus Infection [J]. J Virol. 2019, 93(6):e01815-18.

[7] Ilona Glowacka, Stephanie Bertram, et al. Evidence That TMPRSS2 Activates the Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus Spike Protein for Membrane Fusion and Reduces Viral Control by the Humoral Immune Response [J]. J Virol. 2011, 85(9):4122-34.

[8] Gierer S, Bertram S, et al. The spike protein of the emerging betacoronavirus EMC uses a novel coronavirus receptor for entry, can be activated by TMPRSS2, and is targeted by neutralizing antibodies [J]. J Virol. 2013, 87(10):5502-11.

[9] Bertram S, Dijkman R, et al. TMPRSS2 activates the human coronavirus 229E for cathepsin-independent host cell entry and is expressed in viral target cells in the respiratory epithelium [J]. J Virol. 2013, 87(11):6150-60.

[10] Heurich A, Hofmann-Winkler H, et al. TMPRSS2 and ADAM17 cleave ACE2 differentially and only proteolysis by TMPRSS2 augments entry driven by the severe acute respiratory syndrome coronavirus spike protein [J]. J Virol. 2014, 88(2):1293-307.

[11] Markus Hoffmann, Hannah Kleine-Weber, et al. SARS-CoV-2 Cell Entry Depends on ACE2 and TMPRSS2 and Is Blocked by a Clinically Proven Protease Inhibitor [J]. Cell. 2020, 181(2):271-280.

[12] Sun YJ, Velez G, Parsons DE, et al. Structure-based phylogeny identifies Avoralstat as a TMPRSS2 inhibitor that prevents SARS-CoV-2 infection in mice [J]. J Clin Invest. 2021, 147973.

[13] Wettstein L, Weil T, Conzelmann C, et al. Alpha-1 antitrypsin inhibits TMPRSS2 protease activity and SARS-CoV-2 infection [J]. Nat Commun. 2021;12(1):1726.

[14] Li HH, Liu CC, Hsu TW, et al. Upregulation of ACE2 and TMPRSS2 by particulate matter and idiopathic pulmonary fibrosis: a potential role in severe COVID-19 [J]. Part Fibre Toxicol. 2021, 18(1):11.

[15] Avanzini MA, Mura M, Percivalle E, et al. Human mesenchymal stromal cells do not express ACE2 and TMPRSS2 and are not permissive to SARS-CoV-2 infection [J]. Stem Cells Transl Med. 2021, 10(4):636-642.

[16] Sasaki M, Uemura K, Sato A, et al. SARS-CoV-2 variants with mutations at the S1/S2 cleavage site are generated in vitro during propagation in TMPRSS2-deficient cells [J]. PLoS Pathog. 2021, 17(1):e1009233.


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