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Th1和Th2細胞如何分化?

日期:2023-11-17 09:01:06

根據它們合成和分泌的細胞因子,CD4+輔助T細胞(Th細胞)可以分為兩個亞群,即第一型輔助T淋巴細胞(Th1)和第二型輔助T細胞(Th2)[1]。這兩種類型的細胞均來源于共同的T細胞輔助前體細胞(Thp)。盡管T細胞的分化受到抗原濃度或共刺激分子的影響,但細胞因子是Th細胞分化的最有效調節因子。此外,細胞外微環境和轉錄因子的影響也發揮了重要作用。


1. Th1和Th2細胞

盡管Th1和Th2細胞來源于共同的前體細胞,但它們之間存在一定的差異:

在這里,我們在表格1中列出了一部分CUSABIO甲基化組蛋白抗體。

表1 .Th1和Th2細胞的差異

差異 Th1 Th2
分泌細胞因子 IFN-γIL-2, IL-3, TNF-α, TNF-β IL-4, IL-10, IL-5, IL-9, IL-13
特定的細胞因子 IFN-γ IL-4
調整因子 IFN-γ, IL-12 IL-4, IL-13, IL-5

Th1和Th2細胞的常見分泌細胞因子:GM-CSF,IL-3,TNF


2. Th1/Th2細胞的作用

Th1和Th2細胞在免疫中起著重要作用。Th1細胞刺激細胞免疫反應,參與抑制巨噬細胞活化并刺激B細胞產生IgMIgG1

Th2細胞刺激體液免疫反應,促進B細胞增殖并誘導抗體產生(IL-4)。它還可以誘導肥大細胞的分化和增殖(IL-3、IL-4),以及嗜酸性粒細胞的分化和增殖(IL-5)。

在正常情況下,Th1/Th2細胞的分化處于平衡狀態,一旦Th1/Th2細胞的平衡失調,將導致疾病的發生 [2]。過度表達Th2可能導致不適當的免疫反應,引發過敏和哮喘等疾病。過度表達Th1或Th17可能導致類似風濕性關節炎和多發性硬化癥的自身免疫性疾病 [3] [4]


3. Th1/Th2細胞分化的細胞因子和轉錄因子

參與Th1和Th2分化的細胞因子和轉錄因子

圖1. 參與Th1和Th2分化的細胞因子和轉錄因子

分化Th1和Th2細胞受多種因素調控,而細胞因子起著最重要的作用。調控Th2細胞分化的細胞因子主要是IL-4和IL-13,而IFN-α、IL-12和IFN-γ則調節Th1細胞分化。此外,最近發現IL-18和T1/ST2產物也參與了Th1/Th2細胞分化調控 [5]

3.1 Th1細胞分化中的細胞因子

● IFN-γ

IFN-γ促進Th1細胞分化并抑制Th2細胞分化。研究發現,IFN-γ信號通過阻止STAT6IL-4R受體結合來抑制STAT6信號傳導,這可能是IFN-γ介導Th1細胞分化的可能機制之一 [6]

內源性IFN-γ產生受以下轉錄因子調控:活化T細胞核因子(NFAT)、NF-κBIRF-1家族、ERM、YY1和Hlx

MAPK通路也參與IFN-γ的產生。

● IL-12

通常情況下,IL-12是啟動Th1細胞分化的最重要的細胞因子。IL-12通過激活STAT4并隨后上調IFN-γ的表達來促進Th1分化 [7]。IL-12Rβ2僅在Th1細胞中表達,但IL-4可以抑制IL-12Rβ2的表達,導致T細胞不對IL-12產生反應,促使T細胞分化為Th2 [8]。因此,未能沉默IL-4產生潛力的產生IFN-γ的細胞將破壞Th1免疫 [9]

● IL-18

IL-18是一種新發現的細胞因子。IL-18和IL-12在IFN-γ的產生上有很強的協同作用,雖然IL-18不誘導Th細胞分化,但它對IL-12誘導的Th1細胞分化有影響 [10]

● STAT4

STAT4通過調節IL-12信號參與Th1細胞分化。它是Jak/STAT信號通路的重要調節因子。其活性受IL-12受體信號的影響。

3.2 Th2細胞分化中的細胞因子

● IL-4

IL-4通過STAT6誘導Th2分化。其活性的調節受以下因素影響:NFAT1、C-maf、Bcl-6、GATA-3(NF-κB在發育中的Th2細胞中抑制GATA-3的表達 [11])、IL-13、IL-6。Th1細胞上的MHCII類轉化激活因子抑制IL-4。

● IL-13

IL-13和IL-4共享IL-4R亞單位,誘導相同的基因表達和炎癥反應。

● T1 / ST2

最初在Th2細胞上選擇和表達的T1是一種血清和腫瘤蛋白誘導基因,屬于IL-1R家族。T1/ST2基因僅選擇在Th2細胞上表達,并與IL-4的產生密切相關。

● SOCS

SOCS蛋白在某些信號通路中抑制信號傳導。SOCS-1SOCS-3抑制IFN-γ誘導的抗增殖和抗病毒反應,SOCS-1還抑制B細胞和成纖維細胞中的IL-4信號。同時,SOCS-1可能通過抑制JAK1和STAT6的活化來抑制IL-4的活性,但在Th1細胞和Th2細胞之間不同信號中的作用尚未確認 [12]


4. 轉錄因子

除了細胞因子外,許多轉錄因子也參與Th1細胞和Th2細胞的分化。

4.1 NFAT

NFAT家族成員(NFAT1、NFAT2、NFAT3、NFAT4、NFAT5)具有高度保守的DNA和鈣調素結合位點。NFAT經由鈣調素磷酸化并進入細胞核。然后,在Ras/Raf-MEK-ERK等蛋白激酶的作用下,它與AP-1結合,形成NFAT-AP1復合物結合到DNA并介導基因轉錄。

4.2 C-maf

C-maf是特異性表達于Th2細胞的轉錄因子。C-maf的激活誘導IL-4的表達并促進Th2分化。研究人員發現,C-maf還通過獨立于IL-4的途徑促進Th2分化。此外,C-maf與IL-4R和IL-5R的表達顯著相關,這也可能是C-maf調控IL-4基因表達的重要因素。

4.3 T-bet

T-bet(也稱為T-box 21)是新發現的特異性于Th1的轉錄因子 [13]。在初級CD4+ T細胞中,T-bet主要通過以下方式促進Th1細胞分化:

T-bet刺激IFN-γ的產生并促進Th1細胞分化 [14]

T-bet還上調IL-12β2鏈以促進IL-12的響應 [15]

T-bet可以通過IFN-γ-STAT1通路被激活,這在穩定Th1細胞表型方面起關鍵作用。

在Th2細胞中,T-bet可以與Runx3協同激活IFN-γ。T-bet還結合到IL-4的沉默區域并抑制IL-4的表達 [16]

4.4 GATA-3

GATA-3是GATA家族轉錄因子,在Th2中選擇性地表達,并在Th2分化過程中上調 [17]。它調節IL-4、IL-13和IL-5的表達。

GATA-3表達的調節:除IL-4R/STAT6信號傳導外,GATA-3的表達也可以由其他GATA家族成員(如GATA-1、GATA-3、GATA-4)表達。TCR信號傳導系統對GATA-3的表達也很重要。調節GATA-3功能的其他因素包括:NF-κB、FOG-1。


5. 細胞分化的信號通路

許多信號通路參與了T細胞分化,主要有以下幾個:

5.1 T細胞受體信號通路

T細胞受體信號通路

圖2. T細胞受體信號通路

T細胞受體(TCR)信號傳導和細胞因子信號傳導對于輔助T細胞分化都是必不可少的。特定的TCR轉錄因子,如激活的T細胞核因子(NFATs)、核轉錄因子κB(NF-κB)在T細胞分化中發揮關鍵作用。

TCR的激活可以啟動多個細胞內信號傳導通路,如絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核因子κB(核κB,NF-κB)、AP-1(Fos-Jun)和CaN-NFAT。

T細胞受體(TCR)與抗原遞呈細胞(APC)表面的抗原/組織相容性復合物(MHCⅡ)結合是T細胞激活所需的第一個信號。在這個階段,影響T細胞分化的因素主要是T細胞獲取信號的強度:弱的TCR激活信號可以激活Ca2+流信號,誘導IL-4的合成并促進T細胞分化為Th2;強的TCR激活信號可以激活MAPK通路,誘導IFN-γ的合成,促使T細胞分化為Th1。

此外,TCR觸發的時間長度也影響Th細胞的分化:在存在IL-12的情況下,短暫的TCR觸發啟動Th1分化,而長時間的TCR觸發啟動Th2分化。

5.2 Notch信號通路

Notch信號通路

圖3. Notch信號通路

目前在哺乳動物中已經發現了四種Notch受體,分別是Notch-1Notch-2Notch-3Notch-4。Notch配體包括Jagged家族和Delta-like家族。Jagged家族包括Jagged-lJagged-2,Delta-like家族包括DLL-1DLL-3DLL-4  [18] [19]

Delta-like和Jagged配體分別誘導T細胞極化為Th1和Th2,這與IL-4 / STAT6無關。

5.3 JAK/STAT信號通路

JAK/STAT信號通路

圖4. JAK/STAT信號通路

JAK家族蛋白激酶屬于酪氨酸蛋白激酶,包括JAK1、JAK2、JAK3和TyK2這四個成員。STAT家族包括STAT1、2、3、4、5A、5B和6這七個成員。

JAK-STAT是由細胞因子受體介導的重要信號轉導通路。IFN-γ激活JAK1、JAK2和STAT1,IL-12激活JAK2、TYK2和STAT4,IL-4激活JAK1、JAK3和STAT6。阻斷上述任何步驟都會導致相應的Th細胞分化受到抑制。

5.3.1 Th1分化的信號轉導

IFN-γR和IL-12R介導的信號轉導在Th1分化中起重要作用。

● IFN-γR/STAT1途徑

IFN-γR1和IFN-γR2分別與IFN-γ結合并四聚化。然后,IFN-γR1和IFN-γR2分別被JAK1和JAK2磷酸化,STAT1被招募。被招募的STAT1被磷酸化和激活,從IFN-γR分離出來,二聚化并進入細胞核,結合IFN-γ基因的GAS順式作用元件,從而促進IFN-γ基因的轉錄和表達。

● IL-12R/STAT4途徑

IL-12R是由β1和β2亞單位組成的異二聚體。IL-12Rβ2專門在Th1細胞中表達。當IL-12R與IL-12結合時,JAK2和TyK2被激活,然后磷酸化β1和β2亞單位的細胞質酪氨酸殘基。磷酸化的β1和β2亞單位結合并磷酸化STAT4。然后,STAT4形成同源二聚體或與STAT3形成異源二聚體,并進入細胞核,介導其下游基因的功能。

5.3.2 Th2分化的信號轉導

在Th2分化過程中,JAK1/3/STAT6信號轉導通路主要由IL-4R和IL-13R介導。

● JAK1/3/STAT6途徑

IL-4是促進Th2細胞發展的關鍵細胞因子。IL-4的結合激活IL-4R,與之結合的JAK1/3也被磷酸化和激活。磷酸化的JAK1/3反過來磷酸化IL-4R上的酪氨酸殘基,磷酸化的IL-4R招募并結合STAT6單體。STAT6單體在JAK1/3作用下經歷酪氨酸磷酸化,從IL-4R分離出來形成活性的STAT6二聚體。STAT6二聚體核轉位,進一步啟動IL-4和其他基因的轉錄和表達[20]。類似地,IL-13結合II型IL-4R,通過JAK1/3/STAT6途徑促進許多炎癥基因的轉錄和表達。

5.4 MAPK信號通路

MAPK信號轉導通路包括四個途徑:細胞外信號調節激酶(ERK)、c-Jun N末端激酶(JNK)/應激激活蛋白激酶(SAPK)、P38MAPK和ERK5/BMK1。

JNK、p38和ERK在Th1/Th2分化中的作用

圖5. JNK、p38和ERK在Th1/Th2分化中的作用

5.4.1 JNK在誘導Th1/Th2分化中的作用

JNK是應激激活的蛋白激酶(SAPK),包括JNK1/2/3。JNK/SAPK能夠磷酸化c-Jun、ATF-2,并增加其轉錄活性,促進c-Fos、c-Jun和ATF-2調控基因的表達。

JNK1可以抑制原代CD4+ T細胞分化為Th2,但不影響其分化為Th1;JNK2誘導CD4+ T細胞分化為Th1,促進Th1效應細胞中IFN-γ的分泌,但不影響Th2分化。

5.4.2 P38

P38在誘導Th1/Th2分化中的作用是雙向的。P38MAPK途徑可能通過激活IFN-γ轉錄誘導Th1細胞分化。P38還可以通過促進DC中IL-12的分泌來改變DC的免疫調節功能,誘導CD4+ T細胞分化為Th1,介導Th1類型的免疫應答。

5.4.3 ERK

TCR誘導的Ras-ERK/MAPK途徑能夠誘導Th2分化,并介導Th2類型的免疫應答。

5.5 鈣信號通路

鈣信號通路

圖6. 鈣信號通路

Calcineurin (CaN) 是一種鈣/鈣調蛋白(CaM)依賴性的絲氨酸/蘇氨酸磷酸蛋白磷酸酶,它催化多種已磷酸化蛋白的去磷酸化過程。通過激活核轉錄因子活化的T細胞(NFAT),CaN在T細胞激活、分化和增殖中發揮作用。

在T細胞中,Ca2+水平調節CaN的活性,從而在NFAT的激活中發揮重要作用。

Ca2+-CaN-NFAT的調控過程主要有兩個信號途徑:IP3-Ca2+和DAC-PKC

5.5.1 IP3 Ca2+信號

IP3結合到內質網中的IP3鈣通道,促使細胞質Ca2+濃度增加,然后激活細胞質CaN,CaN與NFAT結合,導致其去磷酸化和激活。激活的NFAT核轉位后,與AP-1家族蛋白等轉錄因子以及其他激活因子結合,形成復合體,共同調控細胞因子的表達。

5.5.2 DAC-PKC信號

DAG激活PKC,抑制PIP2水解,激活IP3水解,使細胞內游離Ca2+不增加。同時,PKC還激活Ca泵,降低細胞內游離Ca2+。PKC還可以激活NFAT、NF-κB、AP-1等核因子,在淋巴細胞的激活和增殖、細胞因子的產生中發揮協同作用。

5.6 NF-κB信號通路

信號通路

圖7. 信號通路

通常情況下,NF-κB及其抑制劑I-κB位于細胞質中。上游激酶的活化(如NF-κB誘導激酶或MEKK1)導致I-κB激酶的激活和I-κB蛋白的磷酸化,使磷酸化的I-κB蛋白與NF-κB分離并降解。游離的NF-κB進入細胞核,激活靶基因的轉錄。NF-κB在Th細胞分化中的作用正在起步階段。已經發現抑制NF-κB活性會阻斷GATA-3的表達。

Hedgehog信號通路也與T細胞分化有一定的關系。我們發現關鍵的Th2細胞因子IL-4是T細胞中Hh信號的一個新的轉錄靶點,為Hh在Th分化中的作用提供了機制 [22]



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