【華美講堂 第十一期】ELISA檢測高性能探討
瀏覽次數(shù)：74 日期：2023-12-19 14:43:53
主題
♦ ELISA檢測高性能探討
講師
申艷麗 武漢華美生物 高級技術(shù)工程師
1971年瑞典學(xué)者Engvail和Perlmann，荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (ELISA) 。
ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，是一種應(yīng)用廣泛的免疫檢測方法。其基本原理是：以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
依據(jù)ELISA基本原理，其可以分為直接法、間接法、雙抗夾心法、競爭法。針對不同的方法，都有其各自的適用性；而針對不同的研究指標(biāo)，都有其相對適用型的ELISA。對于免疫檢測常用方法，免疫組化（Immunohistochemistry, IHC）具有較強(qiáng)針對性，并可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位以及定性分析，一般不用于定量檢測；雖然蛋白質(zhì)印跡（Western Blot, WB）也可進(jìn)行定性和定位(通過提取膜蛋白或核蛋白、胞漿蛋白分別檢測其中抗原含量，進(jìn)而間接反映它們的定位)，定量則可能更加準(zhǔn)確，但其敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于IHC。而ELISA與IHC、WB相比，定量最準(zhǔn)確，靈敏度更高，是蛋白檢測首選方法之一，尤其對于定量分析多個(gè)樣本非常有用，所用試劑和樣品量很少，結(jié)果精確。
ELISA作為一項(xiàng)成熟的檢測技術(shù)，通常在96微孔板中進(jìn)行，可用于檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、唾液、組織裂解液和尿液等多種樣本，通過抗原抗體的特異性反應(yīng)以及顯色反應(yīng)進(jìn)行高通量檢測，其檢測速度快、操作簡單、成本低廉，在生物技術(shù)學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)、生物基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn)室等多機(jī)構(gòu)廣泛應(yīng)用。
