ELISA 試劑盒質(zhì)控流程
華美生物嚴(yán)格的生產(chǎn)和質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)是ELISA試劑盒質(zhì)量的根本保障。華美生物ELISA試劑盒的質(zhì)控指標(biāo)包括：供線性范圍，線性，檢測下限，精度，回收率，穩(wěn)定性和天然樣品檢測。指標(biāo)詳情如下：
1、線性范圍
通過線性范圍，我們可以計算出待測試樣本值。下圖為CSB-E07270h（人脂聯(lián)素，ADP ELISA試劑盒）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| ng/ml | OD1 | OD2 | Average | Corrected |
|---|---|---|---|---|
| 100 | 2.839 | 2.897 | 2.868 | 2.718 |
| 50 | 1.968 | 1.974 | 1.971 | 1.821 |
| 25 | 1.144 | 1.192 | 1.168 | 1.018 |
| 12.5 | 0.709 | 0.733 | 0.721 | 0.571 |
| 6.25 | 0.433 | 0.450 | 0.441 | 0.291 |
| 3.125 | 0.303 | 0.301 | 0.302 | 0.152 |
| 1.562 | 0.242 | 0.223 | 0.233 | 0.083 |
| 0 | 0.149 | 0.151 | 0.150 |
2、線性
線性是實驗準(zhǔn)確性和特異性的測試指標(biāo)。為了測定線性，在基質(zhì)中加入高濃度分析物的樣品并用樣品稀釋液稀釋，生成的產(chǎn)物可在測定的動態(tài)范圍內(nèi)有值，結(jié)果表示為觀察到的百分比。
以CSB-E07270h（人脂聯(lián)素，ADP酶聯(lián)免疫吸附試劑盒）為例：
血清樣品稀釋比分別為：1：100、1：200、1：400和1：800。
細(xì)胞培養(yǎng)物上清液稀釋比分別為1：1、1：2、1：4和1：8。
測試值在80-120％之間并顯示出良好的線性。
| Sample | Serum(n=4) | |
|---|---|---|
| 1:100 | Average( %) | 91 |
| Range ( %) | 85-97 | |
| 1:200 | Average( %) | 97 |
| Range ( %) | 91-103 | |
| 1:400 | Average( %) | 93 |
| Range ( %) | 85-95 | |
| 1:800 | Average( %) | 95 |
| Range ( %) | 90-100 |
| Sample | Cell Culture Supernates(n=4) | |
|---|---|---|
| 1:1 | Average( %) | 97 |
| Range ( %) | 80-100 | |
| 1:2 | Average( %) | 95 |
| Range ( %) | 91-110 | |
| 1:4 | Average( %) | 90 |
| Range ( %) | 85-95 | |
| 1:8 | Average( %) | 96 |
| Range ( %) | 90-100 |
3、檢測下限
檢測下限是靈敏度檢測指標(biāo)。檢測下限越低，靈敏度越高。
4、精度
精度是重復(fù)性的檢測指標(biāo)，是從平均值中測量的變異系數(shù)（CV）。 精度越高，重復(fù)性越好。 常考慮的精度有兩種：批內(nèi)精度和批間精度。
批內(nèi)精度：批內(nèi)精度是測定中孔之間的可重復(fù)性。在一個平板上反復(fù)檢測三個已知濃度的樣品達(dá)二十次來評估CSB-E07270h（人脂連蛋白，ADP ELISA試劑盒）的精確度：CV％<8％。
批間精度：批間精度是分析不同批次間的可重復(fù)性。 在20批次中，檢測三個已知濃度的樣品以評估CSB-E07270h（人脂聯(lián)素，ADP ELISA試劑盒）的精確度：CV％<10％。
| Intra-Assay Precision | Inter-Assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/ml) | 13.215 | 12.894 | 13.438 | 12.897 | 13.109 | 12.963 |
| SD | 0.63 | 0.37 | 0.53 | 1.10 | 0.81 | 1.00 |
| CV(%) | 4.75 | 2.847 | 3.931 | 8.562 | 6.145 | 7.741 |
5、回收率
回收率是實驗準(zhǔn)確性和特異性的檢測指標(biāo)，它反映了樣品分析過程中分析物的損失程度。 回收率越高，精度越高。
華美生物試劑盒，在各種基質(zhì)中，分析物的回收率在整個測定范圍內(nèi)都達(dá)到了很高的水平。
下圖為CSB-E07270h（人脂連蛋白，ADP ELISA試劑盒）的回收率：
| Sample Type | Average(%) | Range(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=5) | 95 | 89-98 |
| EDTA plasma (n=4) | 97 | 90-100 |
6、試劑盒組分穩(wěn)定
一般來說，穩(wěn)定性越好，存儲時間越長。試劑盒組分穩(wěn)定性檢測：將華美生物ELISA試劑盒的主要原料和測定板置于37℃下熱損傷測試7天，然后再與4℃下儲存的原料進(jìn)行比較。若是7天后，原料OD值≤30％，即為合格產(chǎn)品。
7、特異性
特異性是ELISA試劑盒質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。華美生物ELISA試劑盒均選用高特異性原料，以確保ELISA試劑盒的特異性。另外，研發(fā)團(tuán)隊會進(jìn)一步分析試劑盒的交叉反應(yīng)，進(jìn)一步確認(rèn)該試劑盒能且只能識別和檢測目的分析物。
8、天然樣品檢測
天然樣品檢測對于ELISA試劑盒的推廣至關(guān)重要。 華美生物ELISA試劑盒可以檢測自然樣品，樣品值均可供用戶參考。 對于CSB-E07270h（人脂聯(lián)素，ADP ELISA試劑盒），我們在之前以1：500稀釋度測試血清和血漿樣品，測試值為S3-S5。
