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組蛋白SUMOylation

在2003年,Shiio和Eisenman首次在人類HEK293T和P493-6 B細胞中描述了組蛋白SUMOylation,并且顯示其導致轉錄抑制 [1]。隨后,組蛋白SUMOylation也在酵母 [2]、寄生原生動物 [3]和植物 [4]中得到報道。

1. 什么是組蛋白SUMOylation?

組蛋白SUMOylation是指小泛素樣修飾劑(SUMO)與組蛋白蛋白質上的賴氨酸(K)殘基共價結合的過程。

與組蛋白泛素化類似,所有核心組蛋白、連接組蛋白H1、組蛋白變體H2A.Z和H2A.X,以及著絲粒組蛋白變體Cse4在酵母中都可以發生SUMOylation [5-7]。在哺乳動物中,SUMOylation主要發生在H4上,H4的SUMOylation會引發轉錄抑制 [1,8]。由于缺乏像H3K9me和H3K27me這樣的抑制性賴氨酸甲基化標記,酵母中SUMOylation目前是唯一已知的抑制性組蛋白標記。

2. 參與組蛋白SUMOylation的三個組成

組蛋白SUMOylation是一個可逆的過程,由幾種酶和蛋白負責作為“寫入者”、“讀取者”和“擦除者”。

2.1 寫入者

組蛋白SUMOylation寫入者是負責將SUMO標記添加到組蛋白上的酶。

SUMO 酶 物種 寫入者
E1 哺乳動物 SAE1 (Aos1)/SAE2 (Uba2)
E2 酵母和高等真核生物 Ubc9
E3 酵母 Siz1, Siz2 (Nfi1), and Mms21
高等真核生物 PIAS family proteins: PIAS1, PIAS2, PIAS3, and PIAS4; RanBP2, Pc2/CBX4

2.2 讀取者

組蛋白SUMOylation讀取蛋白是能夠識別和結合SUMO化的組蛋白,從而將信號轉化為不同生物學效應的蛋白質。許多蛋白質具有特異的SUMO相互作用結構(SIMs),使它們能夠結合到SUMO修飾的蛋白質,包括SUMO化的組蛋白。這些含有SIM的蛋白質可以包括轉錄因子、染色質重塑蛋白和其他調控蛋白。

讀取者 SUMOylated組蛋白
HP1/CBX Proteins (HP1α/CBX5, HP1β/CBX1, and HP1γ/CBX3) 結合SUMO化的組蛋白,特別是在異染色質區域;參與異染色質的維持
TIF1 (TIF1α/TRIM24 and TIF1β/TRIM28) 與SUMO修飾的組蛋白相互作用,發揮轉錄調控作用
PML 與SUMO修飾的組蛋白相互作用,有助于基因表達和基因組穩定性的調控
SETDB1 在異染色質形成的背景下與SUMO化的組蛋白相互作用
ATRX 與SUMO修飾的組蛋白相互作用,并參與異染色質的調控
BRCA1 在DNA損傷點識別SUMO化的組蛋白
PCNA 在DNA復制和修復過程中與SUMO修飾的組蛋白相互作用
BRD4 在轉錄調控的背景下與SUMO修飾的組蛋白相互作用

2.3 擦除者

組蛋白SUMOylation可以通過去SUMO化酶進行逆轉,也稱為擦除者,其中包括特異性蛋白酶——泛素樣蛋白酶(SENP),它能夠去除組蛋白蛋白質上的SUMO化標記。

DeSUMOylases SUMO擦除者
SENP-1 SUMO-1, SUMO-2/3
SENP-2 SUMO-1, SUMO-2/3
SENP-3 SUMO-2/3
SENP-5 SUMO-2/3
SENP-6 polySUMO-2/3 (SUMO chain)
SENP-7 polySUMO-2/3 (SUMO chain)
USPL1 SUMO-2/3
DeSI1 SUMO-2/3
DeSI2 SUMO-2/3

3. 組蛋白SUMOylation機制

組蛋白SUMOylation通過多步驟的酶依賴性反應協同進行,涉及SUMO E1激活酶、E2連接酶和E3連接酶。所有SUMO蛋白,包括SUMO1-4,首先被催化成成熟形式,其中C-末端的二甘氨酸對于E1介導的腺苷酸化是必不可少的。E1酶,由SAE1和SAE2亞基組成的異源二聚體,以ATP依賴的方式觸發SUMO蛋白的激活,形成E1-SUMO中間體。一旦被激活,SUMO隨后通過酯交換反應從E1-SUMO中間體轉移到E2連接酶UBC9上。最后,E3連接酶PIAS(活化STAT的蛋白抑制劑)和RanBP2(Ran結合蛋白2)促使SUMO從UBC9轉移到目標組蛋白上的特定賴氨酸殘基。

組蛋白SUMOylation和deSUMOylation的催化循環

圖 1. 組蛋白SUMOylation和deSUMOylation的催化循環

該圖片引自:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC9654019/

4. 組蛋白SUMOylation的功能

組蛋白SUMOylation在共轉錄過程中具有多種功能,包括轉錄調控、染色質重塑、轉錄延伸和阻止隱性起始。

組蛋白SUMOylation可以導致核小體結構的改變,從而進行染色質重塑,并影響各種轉錄因子與DNA的結合,從而抑制某些基因的轉錄。

多項研究表明,組蛋白SUMOylation導致轉錄活性的降低。例如,組蛋白4的SUMOylation通過招募HDACs和異染色質蛋白1(HP1)介導轉錄抑制。有趣的是,最近的研究表明,SUMOylation調節了組蛋白修飾酶的活性,例如HDAC1、HDAC2、HDAC4、SIRT1、EZH2和KDM5B,從而間接調節染色質狀態。

此外,在胚胎干細胞中,鏈霉親和素2/3(SUMO2/3)修飾連接器組蛋白H1促使其結合到高度致密的異染色質中。相反,缺乏SUMOylation會導致染色質解緊縮和全能性的恢復 [9]

表 1. 組蛋白SUMOylation位點和功能

物種 組蛋白 SUMOylated位點 功能
Human H2A - 轉錄抑制或染色質壓縮
H3 K18 -
H4 K12 -
H2AX K5, K9, K13, K15, K118, K119, K127, K133, K134 -
S. cerevisiae H2A K126 轉錄抑制/激活,抑制潛在啟動
H2B K6, K7, K16, K17 -
H3   -
H4 K5, K8, K12, K16, K20 -
H2A.Z K126, K133 DNA雙鏈斷裂修復
Cse4 K65, K215, K216 Cse4的整合或蛋白質降解

5. 組蛋白SUMOylation與其他組蛋白修飾的相互作用

H4的SUMOylation增加了其與組蛋白去乙酰化酶HDAC1和異染色質蛋白1 HP1γ的相互作用,與SUMO在轉錄抑制中的作用一致 [1]。已經證明SUMO對于沉積在與基因沉默相關的異染色質的H3K9me3分子標志是必需的 [10,11]

Nathan及其團隊巧妙地運用了化學、生化和遺傳方法,提供了令人信服的證據,表明組蛋白SUMOylation對它們的乙酰化起對抗作用,確立了它作為一種在進化上保守的抑制性標記 [4]。在釀酒酵母中,已經證明組蛋白SUMOylation對抗某些激活修飾,如乙酰化和H2B泛素化(可能在相同的賴氨酸殘基上)[4]。Chatterjee實驗室發現H4K12su能夠刺激轉錄抑制性的LSD1-CoREST1-HDAC1復合物中的去甲基化酶和去乙酰化酶活性。

許多被SUMO化的賴氨酸可以被甲基化、乙酰化或泛素化。在細胞周期中,SUMOylation與磷酸化之間發生相互作用,以實現細胞周期的調節。

6. 組蛋白Sumoylation與疾病

越來越多的證據表明,組蛋白SUMOylation在胚胎發育、細胞分化和疾病狀態中發揮著關鍵作用。SUMOylation過程的失調與各種癌癥、神經退行性疾病和免疫性疾病有關。組蛋白SUMOylation對于維持組蛋白功能和DNA轉錄非常重要,其失衡將影響細胞周期、分化和凋亡,并可能導致腫瘤的發展。

參考文獻:

[1] Shiio Y, Eisenman RN. 2003 Histone sumoylation is associated with transcriptional repression [J]. Proc. Natl Acad. Sci. USA 100, 13 225-13 230.

[2] Ryu, H. Y., Su, D., et al. (2019) The Ulp2 SUMO protease promotes transcription elongation through regulation of histone sumoylation [J]. EMBO J. 38, e102003.

[3] Issar, N., Roux, E., Mattei, D., and Scherf, A. (2008) Identification of a novel post-translational modification in Plasmodium falciparum: protein sumoylation in different cellular compartments [J]. Cell. Microbiol. 10, 1999–2011.

[4] Miller, M. J., Barrett-Wilt, et a. (2010) Proteomic analyses identify a diverse array of nuclear processes affected by small ubiquitin-like modifier conjugation in Arabidopsis [J]. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 16512–16517.

[5] Nathan, D., Ingvarsdottir, K., et a. (2006) Histone sumoylation is a negative regulator in Saccharomyces cerevisiae and shows dynamic interplay with positive-acting histone modifications [J]. Genes Dev. 20, 966– 976.

[6] Kalocsay M, Hiller NJ, Jentsch S (2009) Chromosome-wide Rad51 spreading and SUMO-H2A.Z-dependent chromosome fixation in response to a persistent DNA double-strand break [J]. Mol Cell 33: 335–343.

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[8] Shiio, Y., and Eisenman, R.N. (2003). Histone sumoylation is associated with transcriptional repression [J]. Proc Natl Acad Sci U S A 100, 13225–30.

[9] Sheban, D., Shani, T., et a. (2022). SUMOylation of linker histone H1 drives chromatin condensation and restriction of embryonic cell fate identity [J]. Mol. Cell. 82, 106–122.e9.

[10] Ninova M, Godneeva B, et al. 2020 The SUMO Ligase Su(var)2–10 controls hetero- and euchromatic gene expression via establishing H3K9 trimethylation and negative feedback regulation [J]. Mol. Cell 77, 571-585.e4.

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